Mayo - Agosto

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Art铆culos originales

Comportamiento epidemiol贸gico de la leptospirosis humana en Colombia, 2012-2016

Introducci贸n: La leptospirosis en una enfermedad zoon贸tica, bacteriana de amplia distribuci贸n mundial, con impacto socioecon贸mico desconocido por la falta de estudios epidemiol贸gicos que ofrezcan datos de mortalidad y morbilidad m谩s cercanos a la realidad.
Objetivo: Describir el comportamiento de casos de leptospirosis humana notificados al Sivigila en Colombia durante los a帽os 2012 a 2016.
M茅todos: Estudio observacional descriptivo, mediante el cual se analizaron los registros de los informes anuales de evento de leptospirosis notificados al Sivigila durante los a帽os 2012 al 2016 en Colombia. Para ello se utiliz贸 la hoja de c谩lculo Excel.
Resultados: Durante el quinquenio observado se notific贸 un total de 10 435 casos de leptospirosis. Seg煤n caracter铆sticas sociodemogr谩ficas el mayor n煤mero se present贸 en hombres, el 49,8 % pertenec铆a al r茅gimen subsidiado, la mayor铆a se present贸 en la cabecera municipal y la poblaci贸n m谩s afectada correspondi贸 a "sin identificaci贸n 茅tnica". Dentro de los antecedentes epidemiol贸gicos m谩s importantes se hall贸 el contacto con caninos, ratas en el domicilio y actividades de r铆o.
Conclusiones: La compilaci贸n de los datos epidemiol贸gicos de la vigilancia de leptospirosis humana demuestra que sigue siendo un problema de salud p煤blica, lo cual genera preocupaci贸n y demanda mejoras en las estrategias nacionales de prevenci贸n y control.

Diana Mar铆a Calder贸n-Sierra, Claudia Patricia Jaimes-Bernal, Adriana Mar铆a Pedraza Bernal
717 lecturas
Cloning and expression of a human papillomavirus 18 l1 gene isolated from a Cuban patient in Escherichia coli

Introduction: Human papillomavirus (HPV) vaccines are based on the L1 major capsid protein, which forms the pentameric assembly unit of the viral shell.

Objectives: To clone a HPV-18 l1 gene from a Cuban female patient and to express the full-length and deletion variants of the HPV-18 l1 gene in Escherichia coli, for further vaccine preparation studies.

Methods: The wild-type HPV-18 l1 gene was amplified by PCR from a cervical lesion sample of a Cuban patient and subsequently, it was subcloned into pET26b and pET28a vectors. Three deletion mutants were constructed using PCR based on the HPV-18 l1 gene, which encode truncated proteins lacking 30 amino acids at the C-terminus in combination with 5, 6 or any deleted residue at the N-terminus.

Results: The cloned HPV-18 l1 gene had the highest level of sequence similarity (99.9%) to the African variant EF202152. The C-terminal 30 amino acid truncated HPV-18 L1 was produced at similar levels than the HPV-18 L1s truncated at both ends. The three L1 variants had similar solubility profiles, with a percentage higher than 50 % in the soluble fraction of E. coli SHuffle C3026.

Conclusion: The results of this work suggested that the truncation of thirty amino acid residues at the C-terminus of the HPV-18 L1 had a major contribution to the expression of a wild HPV-18 l1 gene in E. coli. Thus, a C-terminal 30 amino acid truncated HPV-18 L1 could be suitable for preparing a HPV vaccine to prevent persistent HPV infections and cervical cancer in Cuba.

Elsa Pimienta, Sandra Rodr铆guez, Rafael Fando, Adriana Otero, Yunier Serrano, Darien Ortega, Ariel Palenzuela, Karen Marrero
364 lecturas
Efecto de la temperatura y salinidad en la eclosi贸n y supervivencia de Aedes aegypti (L) (Diptera: Culicidae) procedentes del occidente de M茅xico

Introducci贸n: Aedes aegypti (L) (Diptera: Culicidae), es una especie cosmopolita y vector de arbovirosis. Las variaciones de la temperatura y salinidad del agua influyen en la eclosi贸n y supervivencia de fases larvales.
Objetivo: Evaluar el efecto de diferentes temperaturas y salinidades en la eclosi贸n de huevos y la supervivencia de larvas, pupas y adultos bajo condiciones de laboratorio.
M茅todos: Se colectaron larvas de Ae. aegypti, de reservorios artificiales en la zona periurbana de Puerto Vallarta, Jalisco, M茅xico, y se mantuvieron hasta la fase adulta. Los huevos obtenidos se sometieron a ocho temperaturas (15, 17, 20, 25, 27, 30, 32 y 35 掳C). Se colocaron 15 huevos por quintuplicado y se evalu贸 la eclosi贸n durante 96 h. Se colocaron 100 huevos con agua ajustada a 0,3; 2; 5; 10; 15; 18 y 22 ups y se evalu贸 la eclosi贸n hasta las 96 h. Adicionalmente se utilizaron larvas del estadio IV, por quintuplicado, someti茅ndose a las mismas salinidades y se evalu贸 la supervivencia hasta las 48 h. El efecto de la salinidad en la ovoposici贸n de las hembras se llev贸 a cabo introduciendo recipientes con las mismas concentraciones salinas, dentro en las jaulas entomol贸gicas.
Resultados: Se registr贸 el 100 % de eclosi贸n a las 24 y 48 h; la temperatura de 35 掳C no registr贸 eclosi贸n. Las salinidades de 22 y 18 ups, provocaron mortalidad del 100 % a las 24 h. En la salinidad de 15 ups, sobrevivi贸 el 50 %. Las concentraciones de 2, 5 y 10 ups demostraron 100 % de supervivencia hasta la fase de adulto. La supervivencia de larvas del estadio IV en los tratamientos 2, 5 y 10 fue del 100 % y en 15,18 y 22 ups disminuy贸 a 50, 80 y 100 %, respectivamente (p藗 0,05). Las diferentes concentraciones salinas no afectaron significativamente la ovoposici贸n. La eclosi贸n solo se present贸 en las concentraciones de 0,3; 2; 5 y 10 ups. Los huevos ovopositados en concentraciones de 15, 18 y 22 ups no eclosionaron hasta que fueron transferidos a agua dulce con porcentajes de eclosi贸n de entre el 80 y 90 %.
Conclusiones: Los embriones de Ae. aegypti poseen una amplia plasticidad para soportar cambios dr谩sticos de temperatura y salinidad. El control efectivo de sus poblaciones debe incluir la revisi贸n de charcas o reservorios que contengan aguas salobres hasta 18 ups.

J. Diego Galav铆z-Parada, Fernando Vega-Villasante, Mar铆a del Carmen Marquetti, Sa煤l Guerrero-Galv谩n, Olimpia Chong-Carrillo, Jos茅 L. Navarrete Heredia, Fabio G. Cupul-Maga帽a
375 lecturas
Haemostatic alterations caused by the venom of Lansberg's hognosed pitviper (Porthidium lansbergii hutmanni) in Venezuelan patients

Objective: to describe the haemostatic characteristics of the venom as well as the potency appraisal of the polyvalent antiophidic serum against haemotoxicity from Porthidium lansbergii hutmani experimental envenomation.
Methods: Evaluation was performed of the venom's lethality, haemorrhagic activity, effects on coagulation and platelet aggregation, proteolytic activity, and neutralization by the commercial antivenom available in the country.
Results: Several components with haemostatic activities were found in Porthidium l. hutmanni venom when a study of fibrinogenolytic, haemorrhagic and proteolytic activities was conducted of a pool of P.l.h venom. Porthidium l. hutmanni venom lacked the coagulant and defibrinating activities that are characteristic of bothropic venoms. Porthidium l. hutmanni venom showed very high haemorrhagic and anticoagulant activities. These findings could be related to the presence of multiple metalloproteases, which was evidenced in this study, and also the possible presence of phospholipases or other anticoagulant activity proteins that were not defined here. They inhibited platelet aggregation, suggesting that the venom had some proteins with marked effects on haemostasis. The commercial antivenom proved to be of little effectiveness in neutralizing the crude venom haemorrhagic activity.
Conclusions: These toxins cause many physiopathological alterations in bitten patients, creating a clinical picture characterized by oedema, local and systemic haemorrhages, and even necrosis, comparable to that seen in bothropic envenomation. Porthidium l. hutmanni venom has no in vitro procoagulant activity, typical of bothropic venoms, suggesting there are variances in its protein conformation. Porthidium l. hutmanni venom is used for horse immunization. However, in order to preserve the patient's life, it is necessary to improve the immunization process to produce antivenom containing high avidity and specificity antibodies against the major toxins present in this venom. Porthidium l. hutmanni venom has demonstrated being a venom with high lethal, haemorrhagic, proteolytic and procoagulant activities, whose description will have enormous utility among clinicians who deal with these accidents in its geographical distribution areas.

Mar铆a E. Pineda, Alba M. Vargas, Alexis Rodriguez-Acosta
353 lecturas
Acci贸n antiof铆dica de extractos de Myrsine guianensis, Jatropha curcas y Zanthoxylum monogynum

Objetivo: evaluar la inhibici贸n de los venenos de las serpientes Bothrops alternatus y Bothrops moojeni por los extractos vegetales de Jatropha curcas, Myrsine guianensis y Zanthoxylum monogynum, en relaci贸n con las actividades coagulante, fosfolipasa y hemorr谩gica.
M茅todos: Los extractos vegetales se obtuvieron a partir del liofilizado de hojas deJatropha curca, Myrsine guianensis yZanthoxylum monogynum. Se realizaron ensayos de inhibici贸n in vitro con un grupo de control positivo (10 渭g de veneno crudo), grupos experimentales que recibieron una mezcla del veneno con cada uno de los extractos, en concentraciones de 5 a 500 渭g y un grupo de control negativo (500 渭g de extracto). Se realizaron ensayos in vivo con grupos de ratones Balb/c (n = 4). A los ratones del grupo de control positivo se les inyect贸 solamente el veneno (25 渭g); a los de los grupos experimentales, una mezcla del veneno con cada uno de los extractos, en concentraciones de 25 a 500 渭g; y a los del grupo de control negativo, solamente extracto (500 渭g).
Resultados: Jatropha curcas y Myrsine guianensis inhibieron significativamente la actividad fosfolipasa a partir de la proporci贸n 1:0,5 (veneno:extracto). Por otro lado, las actividades coagulante y hemorr谩gica, fueron inhibidas expresivamente a partir de las proporciones 1:1 y 1:5 con Myrsine guianensis y Jatropha curcas, respectivamente. Las actividades fosfolipasa y coagulante fueron inhibidas con Zanthoxylum monogynum a partir de las proporciones 1:5 y 1:10, respectivamente.
Conclusiones: Los extractos analizados inhibieron los venenos de Bothrops alternatus y Bothrops moojeni debido a la presencia de mol茅culas con posibles propiedades antiof铆dicas.

Suelen Xavier Oliveira, Thales Douglas Souza e Silva, Bruno Tumang Frare, L铆via Maria Alves, Mirian Machado Mendes, Veridiana Melo Rodrigues, Jeferson Chagas Nascimento, Vanderl煤cia Fonseca Paula, Luiz Fernando Moreira Izidoro
286 lecturas
Evaluaci贸n de 铆ndices entomol贸gicos mediante herramientas electr贸nicas en Villavicencio, Meta, ColombiaObjetivo: Determinar la eficacia de dos herramientas electr贸nicas en el levantamiento de 铆ndices a茅dicos en la ciudad Villavicencio.
M茅todos: Se realiz贸 un estudio de tipo observacional, anal铆tico en dos barrios de la ciudad Villavicencio: Quintas de San Fernando y Cedritos. El formato de levantamiento de 铆ndices a茅dicos de la secretar铆a de salud fue dise帽ado en dos medios electr贸nicos. La eficacia fue determinada mediante datos efectivos recogidos y tiempo de entrega. Se calcularon 铆ndices a茅dicos, Breteau, vivienda y pupas. Se realiz贸 encuesta para determinar actitudes frente a arbovirosis. Se realiz贸 estad铆stica descriptiva, pruebas de chi cuadrado y t-Student (p< 0,05).
Resultados: Se evaluaron 67 predios en dos barrios. El 铆ndice de datos efectivos fue mejor en donde el acceso a internet era permanente (100 % vs . 23,9 %); el tiempo de entrega tambi茅n se afect贸 por esta conexi贸n. Se encontraron diferencias significativas en el n煤mero de viviendas positivas para Aedes aegypti entre los dos barrios (p= 0,0052); y para el n煤mero de tanques bajos positivos ( p= 0,0123). De los encuestados, el 16,4 % (IC95 % 8,9 %-27,5 %) sab铆a que la transmisi贸n fue por picadura de Ae. aegypti. Para el 79,1%, cada familia fue responsable de eliminar criaderos.
Conclusiones: El uso de herramientas electr贸nicas permite acelerar el flujo de la informaci贸n y crear un sistema eficaz, de f谩cil acceso y seguridad que podr铆a implementarse permanentemente en la vigilancia entomol贸gica y de salud p煤blica.
Brayan Stiven Avila Monsalve, Daniel Fantini, Luz Stella Buitrago Alvarez, Gloria Isabel Jaramillo Ramirez
364 lecturas
Bacteriemia relacionada con cat茅ter por Staphylococcus aureus resistente a meticilina en pacientes con enfermedad renal cr贸nica avanzada

Introducci贸n: Staphylococcus aureus resistente a meticilina constituye la causa principal de bacteriemia relaciona a cat茅ter en pacientes con enfermedad renal cr贸nica avanzada en hemodi谩lisis.
Objetivos: Estimar la tasa de incidencia de bacteriemia relaciona con cat茅ter por Staphylococcus aureus resistente a meticilina en pacientes con enfermedad renal cr贸nica avanzada en el Hospital "General Freyre de Andrade", Cuba, y vigilar los valores de concentraci贸n m铆nima inhibitoria de vancomicina frente a los aislados recuperados de bacteriemia.
M茅todos: El estudio se realiz贸 entre mayo 2017 y febrero 2018, e incluy贸 64 pacientes con Staphylococcus aureus resistente a meticilina (total de los atendidos en hemodi谩lisis). De cada uno se recogi贸 informaci贸n acerca de tipo de acceso vascular y tiempo de uso; de los que desarrollaron un episodio sugerente de bacteriemia se obtuvieron muestras de sangre para hemocultivo. Se inform贸 bacteriemia relacionada con cat茅ter utilizando los criterios de Bouza y otros 2004 y estas se confirmaron debidas a Staphylococcus aureus resistente a meticilina tras determinar la concentraci贸n m铆nima inhibitoria de oxacilina, empleando el m茅todo de microdiluci贸n en caldo y los criterios del CLSI 2017. Asimismo se evalu贸 la concentraci贸n m铆nima inhibitoria de vancomicina.
Resultados: Las tasas de incidencia de bacteriemia relaciona con cat茅ter por S. aureus y Staphylococcus aureus resistente a meticilina fueron de 0,66 y 0,59/1000 d铆as-cat茅ter, respectivamente. Predominaron las bacteriemia relacionada con cat茅ter en los pacientes con accesos vasculares temporales. No se observ贸 incremento en la concentraci贸n m铆nima inhibitoria de vancomicina (1 y 2 mg/mL) para los aislados responsables de bacteriemia a repetici贸n y persistente.
Conclusiones: La tasas de incidencia de bacteriemia relacionada con cat茅ter indican que en la unidad de hemodi谩lisis se mantienen buenas pr谩cticas cl铆nicas. Los valores de concentraci贸n m铆nima inhibitoria de vancomicina sugieren una reducci贸n en la eficacia de la droga en el tratamiento.

Irina Vento Vald茅s, Gilda Tora帽o Peraza, Alejandro Cesar Del Sol Gonz谩lez, Elsa Mar铆a Piquero Lazo
335 lecturas
Conocimientos y pr谩cticas en prevenci贸n de dengue en ciudad afectada por epidemia del dengue posfen贸meno de El Ni帽o Costero, Per煤 , 2018

Objetivo: Describir los conocimientos y pr谩cticas sobre las medidas preventivas de dengue en los pobladores de ciudad afectada por epidemia del dengue posfen贸meno de El Ni帽o costero, Per煤, 2018, y comparar los conocimientos con el cuestionario ENAPRES 2016.
M茅todos: se realiz贸 un estudio descriptivo transversal en el que se recolect贸 informaci贸n mediante dos cuestionarios consecutivos. La muestra se obtuvo con nivel de confianza del 95 %, proporci贸n esperada 29,1 %, precisi贸n de 4,5 %, y poblaci贸n de 8 210 casas, y considerando p茅rdidas ser谩 una muestra de 380.
Resultados: La poblaci贸n estuvo constituida principalmente por mujeres (73,7 %), con edad promedio de 42,5 a帽os, 41,8 % secundaria completa, 54,5 % amas de casa. El medio de obtenci贸n de informaci贸n m谩s frecuente fue el centro de salud (48,7 %). El 21,1 % manifest贸 conocer la enfermedad, el 75 % conoc铆a la transmisi贸n por zancudo y el 86,1 % que este se reproduce en aguas estancadas. Adem谩s, 69,2 % reconoci贸 los s铆ntomas de la enfermedad. El 9,7 % se帽al贸 medidas para eliminar criaderos, mientras el 20,5 % reconoci贸 medidas para evitar ser picado. El 83,2 % manifest贸 conocer el abate y su uso. Los s铆ntomas m谩s identificados por la poblaci贸n fueron fiebre, dolor de cabeza, dolor de huesos y/o articulaciones y dolor muscular. Seg煤n la comparaci贸n realizada con el cuestionario ENAPRES 2016, hubo aumento de conocimiento de los signos de alarma (sangrado, n谩useas y v贸mitos).
Conclusiones: Los conocimientos en prevenci贸n de dengue fueron escasos y las pr谩cticas observadas resultaron insuficientes en la poblaci贸n de Tum谩n, pero mejor贸 el conocimiento en algunas medidas de prevenci贸n con respecto a 2016.

Brenda Stefany Ni帽o-Effio, Hugo Alberto Yong-Cadena, Cristian D铆az-V茅lez
1110 lecturas

Art铆culos de revisi贸n

Melaine Gonz谩lez-Garc铆a, Ludger St盲ndker, Anselmo Jes煤s Otero-Gonz谩lez
491 lecturas

Comunicaciones breves

Proteolysis assessment in isolated Plasmodium falciparum living cells at the asexual blood stages

It has been demonstrated that proteases play crucial roles in Plasmodium falciparum infection and therefore have been considered as targets for the development of new therapeutic drugs. The aim of this study was to describe the specific proteolytic activity profile in all blood stages of P. falciparum isolated parasites in order to explore new antimalarial options. For this purpose, we used the fluorogenic substrate Z-Phe-Arg-MCA (Z: carbobenzoxy, MCA: 7-amino-4-methyl coumarine) and classic inhibitors for the different classes of proteolytic enzymes, such as phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), 1.10-phenantroline, pepstatin A and E64 to study the inhibition profiles. As expected, due to the high metabolic activity in mature stages, the substrate was mostly degraded in the trophozoite and schizont, with specific activities ~ 20 times higher than in early stages (merozoite/rings). The major actors in substrate hydrolysis were cysteine proteases, as confirmed by the complete hydrolysis inhibition with E64 addition. Proteolytic activity was also inhibited in the presence of PMSF in all but the schizont stage. However, PMSF inhibition was the result of unspecific interaction with cysteine proteases as demonstrated by reversion of inhibition by dithiotreitol (DTT), indicating that serine protease activity is very low or null. To our knowledge, this is the first report aiming to describe the proteolytic profile of P. falciparum isolated parasites at all the erythrocytic cycle stages. The results and protocol described herein can be useful in the elucidation of stage specific action of proteolysis-inhibiting drugs and aid in the development of antimalarial compounds with protease inhibitory activity.

Laritza Rojas, Alexandre Budu, Sarah El Chamy Maluf, Pollyana S. Melo, Mayrim M. Gomes Smaul, Adriana K. Carmona, Marcos L. Gazarini, Maday Alonso del Rivero
262 lecturas
Determinaci贸n de biopel铆culas y betalactamasas de espectro extendido en Vibrio cholerae no-O1, no-O139 aislados de pacientes con diarreas en CubaVibrio cholerae no-O1, no-O139 es el tercer grupo de bacterias del g茅nero Vibrio que con m谩s frecuencia producen diarreas. Sobrevive en los ambientes acu谩ticos, utilizando la formaci贸n de biopel铆cula como mecanismo de supervivencia que propicia la transmisi贸n de la enfermedad diarreica. Desde 1977 se caracterizan aislados de V. cholerae con resistencia m煤ltiple, y algunos de los mecanismos involucrados incluyen la producci贸n de 尾-lactamasas de espectro extendido (BLEE). Este trabajo tuvo como objetivo determinar la formaci贸n de biopel铆cula en los aislados cubanos de V. cholerae no-O1, no-O139, causantes de enfermedad diarreica aguda (EDA), y detectar la producci贸n de BLEE en aquellos con resistencia total e intermedia a ampicilina. Se realiz贸 un estudio descriptivo de corte transversal, entre enero 2014 y junio 2015. Se estudiaron 55 aislados caracterizados previamente, que formaban parte del cepario del Laboratorio Nacional de Referencia de EDA del Instituto "Pedro Kour铆". Para la determinaci贸n fenot铆pica de BLEE se estudiaron 43, de los que ya se conoc铆a su susceptibilidad a ampicilina. El 54,5% de los aislados resultaron positivos a la formaci贸n de biopel铆cula, y predominaron los clasificados como formadores moderados (46,6 %) y d茅biles (36,6 %). De los 34 resistentes a ampicilina, 26,4 % resultaron positivos a la producci贸n de BLEE. En el caso de los nueve aislados con resistencia intermedia a ampicilina, 44,4 % resultaron positivos. Los resultados del presente estudio contribuyen al conocimiento sobre la capacidad que tienen de persistir en el ambiente y permiten profundizar sobre los mecanismos de resistencia a los antimicrobianos.

Anabel Fern谩ndez-Abreu, Laura del Carmen Bravo-Fari帽as, Giselle Rivero-Navea, Fidel Angel Nu帽ez-Fern谩ndez, Yanaika Cruz-Infante, Adalberto 脕guila-S谩nchez, Jenny L谩zara Hern谩ndez-Mart铆nez
213 lecturas
Evaluaci贸n de la viabilidad de Legionella pneumophila en muestras de agua

Introducci贸n: Legionella pneumophila se sit煤a entre los principales agentes causales de neumon铆a adquirida en la comunidad y de origen nosocomial. La inhalaci贸n de aerosoles potencialmente contaminados con la bacteria, producto de la colonizaci贸n de redes y otros sistemas que utilizan agua, representa un peligro para la salud de los individuos expuestos.
Objetivo:
evaluar la viabilidad de L. pneumophila en muestras de agua almacenadas en diferentes intervalos de tiempo para el diagn贸stico por cultivo microbiol贸gico de Legionella spp.
M茅todos: Se contaminaron artificialmente muestras de agua con dos cepas de L. pneumophila de serogrupos diferentes y la conformaci贸n de una mezcla de ellas, para un total de 15 muestras. Los frascos contaminados fueron procesados a las 24 h, 72 h, 7 d铆as, 14 d铆as y 21 d铆as. Se realiz贸 cultivo microbiol贸gico seg煤n ISO 11731: 2004 y PNO 03-013: 2015.
Resultados: Se demostr贸 viabilidad de la bacteria en muestras almacenadas hasta 21 d铆as. El m茅todo de concentraci贸n por filtraci贸n result贸 tener los mayores recobrados del microorganismo.
Conclusiones: El tiempo de almacenamiento de las muestras afecta la viabilidad de L. pneumophila. Sienta las bases para estudios posteriores de robustez del diagn贸stico de L. pneumophila como parte del servicio que presta el Centro de Investigaciones Cient铆ficas de la Defensa Civil en los programas de prevenci贸n y control Legionella spp. en instalaciones de inter茅s tur铆stico e industrial.

Majela Garc铆a Montero, Nibaldo Luis Gonz谩lez Sosa, Humberto Franco Villavicencio, Gloria Greite Jim茅nez Alfonso
257 lecturas
Zhaily Gonz谩lez Rodr铆guez, Hilda Mar铆a Hern谩ndez 脕lvarez, Ingrid Domenech Ca帽ete, Idalia Sariego Ramos
303 lecturas

Cartas al editor

Letalidad por dengue en centros asistenciales del Seguro Social de Per煤 durante El Ni帽o Costero, Norte Per煤, 2017
Cristian D铆az-V茅lez, Juan Alberto Leguia-Cerna, Pablo Ronal Puescas-S谩nchez, Oscar Medrano-Vel谩squez
141 lecturas

Presentaciones de casos

Carlos Alejandro Fonseca Marrero, J贸se Alejandro 脕vila Cabreja, Carlos Miguel Fonseca G贸mez, Roberto Radames Larrea Fabra, Jorge Mederos Hern谩ndez, Hayd茅e Fern谩ndez Massip
231 lecturas
Noel Lorenzo Villalba, Saturnino Suarez Ortega
316 lecturas