Evaluaci贸n preliminar de la actividad de Ageratina havanensis contra dengue virus 2

Introducci贸n: El dengue es la enfermedad viral transmitida por mosquitos de m谩s r谩pida propagaci贸n en el mundo. A pesar de la alta incidencia de la enfermedad no existe tratamiento antiviral efectivo ni vacuna aprobada para su uso contra esta infecci贸n. La planta Ageratina havanensis ha sido ampliamente utilizada por nuestra cultura popular y en otros pa铆ses debido a sus diversas propiedades biol贸gicas.

Objetivo: Evaluar la actividad antiviral de cuatro extractos provenientes de Ageratina havanensis y dos flavonoides aislados de dicha planta frente al virus dengue 2.

M茅todos: La pesquisa primaria de actividad antiviral de cada extracto y flavonoide se realiz贸 mediante el ensayo de detecci贸n de la productividad v铆rica, y se evalu贸 la acci贸n virucida de los extractos etan贸lico de tallo y butan贸lico de hoja.

Resultados: Todos los extractos inhibieron la replicaci贸n viral al evidenciarse disminuci贸n del n煤mero de placas de lisis, sin embargo, no se evidenci贸 disminuci贸n del t铆tulo infectivo viral en el ensayo virucida. El tratamiento con la sakuranetina mostr贸 valores de inhibici贸n de la productividad viral entre 61-91 %, y para la 7-metoxiaromadendrina se registraron valores de reducci贸n viral entre 64-86 %.

Conclusiones: Los extractos y flavonoides aislados de Ageratina havanensis mostraron acci贸n antiviral. Los extractos etan贸lico de tallo y butan贸lico de hojas no poseen acci贸n virucida sobre la cepa viral empleada. El presente trabajo constituye el primer informe respecto a la evaluaci贸n de extractos y compuestos aislados de A. havanensis frente al virus dengue.

Gloria del Carmen del Barrio Alonso, Yenisey Jardines Figueredo, Iraida Spengler Salabarr铆a, Trina Haydee Garc铆a P茅rez, Annelle Roque Quintero, Mayling 脕lvarez Vera
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Evaluaci贸n preliminar de la actividad antiviral de Ageratina havanensis frente al virus dengue-2 utilizando ensayos inmunoenzim谩ticos

Introducci贸n: Se presenta la evaluaci贸n preliminar de la actividad antiviral de extractos de Ageratina havanensis (etan贸lico de tallo, AH-T-EtOH; butan贸lico de hoja, AH-H-ButOH y acetato de etilo de hoja, AH-H-AcEtO) utilizando dos sistemas inmunoenzim谩ticos, un ELISA celular (ELISAc) y la t茅cnica de inmunoperoxidasa. Objetivo: Evaluar la actividad antiviral de los extractos de Ageratina havanensis utilizando dos sistemas inmunoenzim谩ticos.

M茅todos: Se normaliz贸 y emple贸 un ELISAc y la t茅cnica de inmunoperoxidasa en evaluar de forma preliminar la actividad antiviral de tres extractos de Ageratina havanensis a diferentes concentraciones y tiempos de adici贸n mediante la detecci贸n de la expresi贸n de la prote铆na E del virus dengue.

Resultados: El ELISAc logr贸 como par谩metros 贸ptimos: l铆nea celular Vero, ant铆geno viral en cultivo de c茅lulas, tiempo de expresi贸n de la prote铆na E de 96 h, compuesto fijador metanol-acetona y bloqueador leche descremada al 1 %. La menor expresi贸n de la prote铆na E (mayor inhibici贸n sobre la replicaci贸n viral), fue al adicionar el extracto AH-T-EtOH a su mayor concentraci贸n y 1 h antes de inocular el virus dengue-2 cepa A15 (VDEN-2 A15). El extracto AH-H-ButOH a concentraciones de 125 碌g/mL y 250 碌g/mL present贸 una ligera limitaci贸n de expresi贸n de E 1 h despu茅s de la inoculaci贸n viral. El extracto AH-H-AcEtO a las concentraciones empleadas, no mostr贸 difererencia a帽adido antes y despu茅s de la inoculaci贸n. El ensayo de inmunoperoxidasa exhibi贸 resultados an谩logos para los extractos.

Conclusiones: La mayor inhibici贸n de la replicaci贸n viral fue obtenida con el extracto AH-H-ButOH, a su mayor concentraci贸n y ambos tiempos de adici贸n. Los ensayos inmunoenzim谩ticos aplicados son herramientas 煤tiles para evaluar extractos de Ageratina havanensis con posible actividad antiviral.

Maritza Pupo Ant煤nez, Dailyn Medero D铆az, Susana V谩zquez Ramudo, Luis Francisco Morier D铆az, Mayling 脕lvarez Vera, Gloria del Barrio Alonso
 
Metodolog铆a de pesquisa primaria de actividad antidengue a partir de productos naturales

Introducci贸n: El virus dengue, transmitido por mosquitos del g茅nero Aedes ha reemergido en los 煤ltimos a帽os produciendo la enfermedad transmitida por artr贸podos con mayor prevalencia en humanos, y no existe una terapia antiviral espec铆fica ni vacunas, para su tratamiento y prevenci贸n. Ello ha motivado la b煤squeda de productos y compuestos naturales con actividad antiviral, lo cual trae consigo la necesidad de establecer un sistema de evaluaci贸n de productos naturales y sint茅ticos mediante una metodolog铆a de pesquisa r谩pida in vitro.

Objetivo: Proponer un sistema de pesquisa primaria de actividad antiviral contra el virus dengue basado en c茅lulas.

M茅todos: Se utilizaron como fuentes primarias de informaci贸n trabajos publicados en revistas nacionales e internacionales registradas en las bases de datos SciELO o PubMed. Los ejemplos seleccionados en las figuras y tabla proceden de las publicaciones conjuntas del Grupo de Virolog铆a de la Facultad de Biolog铆a de la Universidad de La Habana y del Laboratorio de Arbovirus del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kour铆.

Informaci贸n, an谩lisis y s铆ntesis: Se presentan las principales metodolog铆as basadas en c茅lulas, y se enfatiza en aquellas asumidas por nuestro grupo (evaluaci贸n de la citotoxicidad y el ensayo primario de actividad antiviral). Se muestra el algoritmo de evaluaci贸n de un producto. La metodolog铆a descrita ha permitido poner en marcha un programa de b煤squeda de f谩rmacos antidengue, teniendo en cuenta los criterios de la evaluaci贸n de la eficacia antiviral y la toxicidad, para realizar un estudio posterior de mecanismo de acci贸n de los diferentes compuestos o productos evaluados.

Gloria Del Carmen Del Barrio Alonso, Mayling Alvarez Vera
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Evaluaci贸n de la actividad antiviral del alga parda Sargassum fluitans frente a Echovirus 9

I

Introducci贸n: Echovirus 9 es un enterovirus humano de alta prevalencia que ocasiona graves enfermedades sist茅micas como la meningitis as茅ptica y en menor medida mortalidad infantil. No existe tratamiento antiviral o vacunaci贸n para este virus, como ocurre con la mayor铆a de los enterovirus. Las algas del g茅nero Sargassum constituyen una fuente promisoria de compuestos con actividad antiviral, lo cual motiva la b煤squeda de nuevos f谩rmacos contra estos virus.
Objetivo: evaluar la actividad antiviral in vitro de un extracto hidroalcoh贸lico del alga parda Sargassum fluitans frente a Echovirus 9.
M茅todos: se realiz贸 la determinaci贸n cualitativa de los tipos de metabolitos secundarios (tamizaje fitoqu铆mico) presentes en el extracto seg煤n la t茅cnica de Rondina y Coussio, 1969. Se evalu贸 la citotoxicidad del extracto en la l铆nea celular Vero mediante el m茅todo del MTT y se calcul贸 la CC50 mediante an谩lisis de regresi贸n lineal. El c谩lculo de la actividad antiviral (CE50) se realiz贸 mediante la inhibici贸n del efecto citop谩tico en c茅lulas Vero. Se determin贸 el 铆ndice selectivo (IS)= CC50/EC50.
Resultados: el tamizaje fitoqu铆mico mostr贸 la presencia de quinonas, proantocianidinas, catequinas, triterpenos polares, taninos hidrolizables, az煤cares reductores, az煤cares no reductores y prote铆nas. El extracto no fue citot贸xico a las concentraciones evaluadas e inhibi贸 de forma potente la replicaci贸n de Echovirus 9 en la l铆nea celular empleada con un elevado IS (95,05).
Conclusiones: el extracto hidroalcoh贸lico de S. fluitans posee actividad antiviral in vitro frente a Echovirus 9. Este es el primer informe de actividad antiviral de esta especie frente a enterovirus.

Liena de Regla Ponce Rey, Gloria del Carmen del Barrio Alonso, Iraida Spengler Salabarr铆a, Sonia Resik Aguirre, Annele Roque Quintero
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Actividad antiviral de un extracto acuoso del alga roja Laurencia obtusa frente a virus influenza A y B

Introducci贸n: la terapia antiviral frente a las infecciones provocadas por virus influenza se basa en empleo de inhibidores de las prote铆nas M2 y neuraminidasa (NA). Sin embargo, la emergencia de cepas estacionales resistentes a ambos grupos de f谩rmacos motiva la b煤squeda de nuevos f谩rmacos anti-influenza. Los extractos de algas pueden ser utilizados como fuente para la obtenci贸n de estos compuestos, teniendo en cuenta la diversidad de metabolitos descrita en estos organismos.
Objetivo: evaluar la actividad antiviral in vitro de un extracto acuoso del alga roja Laurencia obtusa frente a virus influenza A (H1N1), A (H3N2) e influenza B.
M茅todos: se evalu贸 la citotoxicidad en c茅lulas MDCK, mediante c谩lculo de la viabilidad celular, en presencia de concentraciones crecientes del extracto. Los efectos sobre la replicaci贸n viral se cuantificaron mediante determinaci贸n de los niveles de la hemaglutinina (HA) y de la inhibici贸n del efecto citop谩tico (ECP). El 铆ndice selectivo (IS) se calcul贸 a partir de la relaci贸n IS=CC50/CE 50.
Resultados: el extracto acuoso de Laurencia obtusa posee actividad antiviral in vitro frente a virus influenza B, A (H3N2) y A (H1N1) con valores de IS de 7,73; 11,79 y 12,95; respectivamente.
Conclusiones: Laurencia obtusa inhibe la replicaci贸n de virus influenza de elevada importancia cl铆nica. La realizaci贸n de ensayos secundarios de caracterizaci贸n de la actividad biol贸gica, as铆 como de caracterizaci贸n molecular del extracto, podr铆an permitir el desarrollo de novedosos compuestos antivirales. Este trabajo constituye el primer informe de actividad inhibitoria de esta especie de macroalga frente a virus influenza.

Amilcar P茅rez-Riverol, Alexander Pi帽贸n Ramos, Luis Francisco Morier D铆az, Yuneysi Torres L贸pez, Dianeya Mendoza Llanes, Gloria del Barrio Alonso
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